中药复方PC—SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖及

中药复方PC—SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖及其对AR， PSA表达的影响(3)

http://www.100md.com 2015年3月1日中国中药杂志 2015年第5期

2.4 流式细胞仪检测细胞周期分布取对数生长期的LNCaP细胞经胰酶消化后，以5×10⁵个/孔的细胞数接种于6孔板中，每孔2 mL。待细胞贴壁后，阴性对照组加入含0.1%乙醇的培养液，实验组加入终质量浓度为240 mg·L^-1 PC-SPES Ⅱ，分别于37 ℃，5%CO₂培养箱中培养0，12，24，48 h后，消化收集细胞，用预冷PBS洗1次，加入预冷70%乙醇固定细胞，4 ℃过夜。离心弃上清，用预冷PBS洗1次，加入0.5 mL PI/RNase Staining Buffer，室温孵育15 min。使用流式细胞仪检测细胞周期分布。

2.5 Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态取对数生长期的LNCaP细胞经胰酶消化后，以1×10⁵个/孔的细胞数接种于24孔板中 ......

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